三种结核抗体快速测试方法临床应用的对比观察

廖桂东　吴小珍　许叔祥　杨文如　陶义训　俞海燕

　　近年来结核分支杆菌数种特异性抗原的发现与纯化，实验技术的不断发展，利用ELISA法或金标法测定患者血清中结核抗体用来诊断活动性肺结核已在临床应用，敏感性和特异性都在不断提高，但因所用的抗原及技术各不相同，各方法及试剂间仍有较大差异。本文对目前常用的斑点吸附免疫金标法、斑点渗漏免疫金标法及最新推广的双向层析免疫金标法的临床应用效果作对比观察。

材料和方法

　　一、材料
　　(一)肺结核病人血清：170例中男性117例；女性53例。平均年龄50.1岁(15～85岁)均为上海市肺科医院的住院病人，其诊断依据为痰结核菌涂片、培养、X胸片及临床症状和试验性治疗效果。
　　(二)非结核病人血清：肺癌36例，其它肺部感染30例，均按各自疾病的标准明确诊断。
　　(三)健康人：健康献血员30例。
　　二、试剂
　　(一)双向层析免疫金标法由澳卡国际有限公司提供的ICT结核病快速测试卡，次卡为专利的特殊双叶结构。
　　(二)斑点吸附免疫金标法为梳状测试卡(MycoDot)
　　(三)斑点渗漏免疫金标法为方块状测试板(DIGFA)
　　所有操作均按各自说明书要求进行，同一份血清标本用三种试剂平行测定，两人同时操作，最后各自判读，双方核对，留档备查。

结　　果

　　109例活动性肺结核病人，以涂片阳性、培养阳性或二项均阳性为痰菌阳性组，61例痰菌阴性但经临床明确诊断的肺结核病人，并以肺癌、肺部感染病人及健康人为对照，分别统计三种不同测定方法制结果。
　　肺结核170例，其中当天新鲜血清60例，测定总的灵敏度ICT为80.0%，MycoDot为40.0%，DIGFA为96.7%。冻融标本(-20℃保存7～15天)110例，测定总的灵敏度ICT为60.9%，MycoDot为43.6%，DIGFA为75.5%。肺癌和肺炎作为非结核对照66例和30例健康献血员，总的特异性ICT为91.7%，MycoDot为89.6%，DIGFA为54.2%。见表1。

表1　三种方法的阳性率比较

　　从三种不同方法对结核检测的灵敏度看，DIGFA＞ICT＞MycoDot，从对非结核的肺癌、肺炎和正常人的检测的特异性看，ICT＞MycoDot＞DIGFA。DIGFA虽对结核有较高的灵敏度(82.9% 141/170)但对非结核的肺癌、肺部感染及正常人有高达45.8%的交叉，特异性仅为54.2%，显然过于灵敏而失去了鉴别诊断的特异性。
　　ICT抗原采用的是结核分支杆菌活动期产生的五种分泌性可溶性蛋白，其中38kDa抗原是一种参与磷酸盐代谢的胞外脂蛋白，由于有五种特异抗原存在，大大增加了捕捉不同抗体的机会，从而提高了检测的灵敏度。
　　从实验的过程来看，新鲜血清的阳性检出率高于冻融血清，且三种方法情况一致，提示测定结核抗体应选用当天新鲜血清，由于这是快速实验且可单个进行，完全可以即刻报告或当天完成测定。

作者单位：廖桂东（上海市肺科医院　200433）
吴小珍（上海市肺科医院　200433）
许叔祥（南洋医学放射免疫检测中心）
杨文如（南洋医学放射免疫检测中心）
陶义训（上海第一医科大学医学检验试验室）
俞海燕（上海第一医科大学医学检验试验室）

收稿日期：1999-01-04