活动性肺结核Ｔ细胞亚群分布特点

任　涛1,张　敏2,张　艺3,梅　建4
(1.复旦大学中山医院　上海　200032;2.复旦大学中山医院肿瘤分部　上海　200052;
 3.上海市监狱总医院　上海　200082;4.上海市疾病预防与控制中心　上海　200336)

　　ＣＤ4+Ｔ和ＣＤ8+Ｔ是结核病患者产生保护性免疫反应的主要效应细胞。在结核菌感染的早期活化的ＣＤ4+Ｔ和ＣＤ8+Ｔ就向感染灶转移和聚集,通过递呈抗原、参与结核结节的形成、溶解被感染的细胞以及直接杀菌等作用来控制结核菌扩散和防止结核病的复燃[1～3]。本研究采用流式细胞仪观察活动性肺结核患者外周血ＣＤ4+Ｔ和ＣＤ8+Ｔ细胞亚群分布,进一步明确Ｔ细胞亚群与结核病发病的关系。

　　对象与方法

　　一、研究对象
　　经痰结核菌检查阳性而确诊的活动性肺结核患者18例,18～40岁,平均年龄(32±12)岁,均为男性,初发,未经抗结核治疗。所有病例均排除心、肝、肾脏器合并症,无糖尿病、肿瘤等免疫相关性或免疫性疾病,ＨＩＶ(-),4月内未用过激素及免疫抑制剂。健康对照组18例,18～35岁,平均年龄30岁,均为男性,有ＢＣＧ接种史,均排除心、肝、肾以及代谢和免疫性疾病。
　　二、方法
　　分离并培养ＰＢＭＣｓ,细胞表面抗原染色和胞内细胞因子染色,流式细胞仪检测ＣＤ3+Ｔ细胞和ＣＤ4+Ｔ细胞,以荧光抗体染色阳性细胞的百分率记录结果。
　　三、统计分析
　　所获计量资料以ｘ±ｓ表示,均数间比较用ｔ检验,采用ＳＰＳＳ10.0软件分析。Ｐ<0.05为有统计学差异。

　　结　　果

　　一、活动性肺结核患者ＰＢＭＣｓ中Ｔｈ1和Ｔｈ2细胞百分率见表1
　　与健康对照组相比,活动性肺结核患者外周血单个核细胞(ＰＢＭＣ)中ＣＤ4+Ｔ百分率增高,Ｔｈ1细胞和Ｔｈ2细胞百分率均明显降低。

    二、活动性肺结核患者ＰＢＭＣｓ中Ｔｃ1和Ｔｃ2细胞百分率见表2
    与健康对照组相比,活动性肺结核患者ＰＢＭＣｓ中ＣＤ8+Ｔ细胞百分率减少,Ｔｃ1细胞百分率明显减低,而Ｔｃ2细胞百分率与健康人无差别。

    三、活动性肺结核患者ＰＢＭＣｓ中Ｔｈ1/Ｔｈ2和Ｔｃ1/Ｔｃ2比值见表3
    与健康对照组相比活动性肺结核患者ＰＢＭＣ中ＣＤ4/ＣＤ8比值较高,Ｔｈ1/Ｔｈ2比值与健康人相同,Ｔｃ1/Ｔｃ2比值较低。

    四、活动性肺结核患者ＣＤ4+Ｔ和ＣＤ8+Ｔ细胞中ＩＦＮ的ＩＬ-4阳性细胞的百分率见表4
    肺结核患者ＣＤ4+Ｔ和ＣＤ8+Ｔ细胞中分泌ＩＦＮ的细胞百分率均明显低于健康人。肺结核患者ＣＤ4+Ｔ中ＩＬ-4阳性细胞百分率低于健康人,而ＣＤ8+Ｔ细胞中ＩＬ-4阳性细胞百分率却高于健康人。

    讨　　论

    ＣＤ4+Ｔ和ＣＤ8+Ｔ细胞是结核病机体参与Ｔｈ1/Ｔｈ2免疫反应的主要细胞[1～3]。以ＩＦＮ-γ和ＩＬ-2等介导的Ｔｈ1类免疫反应主要通过活化巨噬细胞、杀伤性Ｔ细胞等效应细胞,杀伤感染的靶细胞,从而达到清除胞内病原体的目的;而以ＩＬ-4、ＩＬ-5、ＩＬ-10等介导的Ｔｈ2类免疫反应参与病情迁延与免疫损伤[3,5～7]。我们通过对Ｔ淋巴细胞进行表面抗原和胞内细胞因子染色,检测肺结核患者ＣＤ4+Ｔ和ＣＤ8+Ｔ细胞亚群分布及其分泌细胞因子的能力,以探讨其与肺结核患者Ｔｈ1/Ｔｈ2类免疫反应失衡的关系。
    本研究发现活动性肺结核患者ＰＢＭＣｓ中ＣＤ8+Ｔ细胞、Ｔｈ1细胞、Ｔｈ2细胞和Ｔｃ1细胞百分率低于健康人,而ＣＤ4+Ｔ细胞百分率和ＣＤ4+Ｔ/ＣＤ8+Ｔ比值高于健康人,Ｔｃ1/Ｔｃ2比值减低。评估单一细胞分泌细胞因子的能力,可见肺结核患者ＣＤ4+Ｔ和ＣＤ8+Ｔ分泌ＩＦＮ-γ的能力低下,ＣＤ4+Ｔ分泌ＩＬ-4减少,而ＣＤ8+Ｔ分泌ＩＬ-4却增加。
    以上结果表明肺结核患者在发病初期体内存在Ｔ细胞亚群分布紊乱,肺结核患者Ｔｈ1细胞和Ｔｃ1细胞的减少以及产生ＩＦＮ-γ能力减低可能是结核病机体Ｔｈ1类免疫反应受损的重要原因。而抗ＩＬ-4染色阳性ＣＤ4+Ｔ细胞百分率低下,而抗ＩＬ-4染色阳性ＣＤ8+Ｔ细胞百分率增高,提示ＣＤ8+Ｔ可能是结核病机体分泌过多ＩＬ-4的主要细胞[8,9]。

本文关键字：T细胞,结核防治,结核,肺结核